JNK2、TIMP-1及Collagen Ⅲ在胆道闭锁肝纤维化中的作用研究
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- 目的研究c—Jun氨基末端激酶2(c—Jun Nterminal kinase, JNK2)、金属蛋白酶组织抑制剂—1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP—1)及CollagenⅢ 在胆道闭锁(BA)肝组织中的表达情况及在肝纤维化进程中的作用。方法选取胆管扩张症肝活检病例10 例,为胆扩组;BA肝活检病例15 例,为BA组;BA晚期因肝功能衰竭而行肝移植患者自体肝活检10例,为肝移植组。采用HE染色观察并评价肝标本纤维化程度;免疫组化染色检测JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ在肝组织中的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT—PCR)检测肝组织中JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ基因表达情况。结果①HE染色: 胆扩组偶可见少许纤维细胞增生;BA组汇管区增宽,纤维组织增生、桥接纤维化现象普遍,可见假小叶形成;肝移植组汇管区明显增宽,纤维组织增生较重,广泛桥接纤维组织形成,假小叶显著。②免疫组化:胆扩组JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ表达为弱阳性,BA组及肝移植组JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ蛋白均在肝细胞、汇管区胆管上皮细胞及血管内皮细胞胞质中阳性表达。③半定量分析:三组JNK2(0122±0008、0182±0017 和0198±0033),TIMP—1(0123±0009、0185±0012和0201±0017)和CollagenⅢ(0126±0012、0194±0008和0208±0033)表达比较,差异有显著统计学意义(P<0001);三组中,BA组及肝移植组JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ表达明显高于胆扩组(P<005);肝移植组JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ蛋白含量与BA组比较,差异无统计学意义(P值均>005)。④qRT—PCR:三组JNK2、TIMP—1和CollagenⅢmRNA表达水平比较,差异有统计学意义(0221(017)vs 1395(122)vs 1095(121),H=17686,P=0003;0439(031)vs 1404(085)vs 1571(066),H=20648,P=0000;0917(009)vs 1802(135)vs 1957(130),H=15555,P=0007),BA组及肝移植组肝内JNK2、TIMP—1及CollagenⅢmRNA表达含量比胆扩组高(P值均小于0017)。结论JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ在BA患儿随着肝纤维化加重而表达升高,表明其可能参与并促进BA肝纤维化进程。
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