[1]张雁冰 刘朝阳 卢其 周小渔. RNA干扰对神经母细胞瘤细胞VEGFA的ｍRNA表达的影响[J].临床小儿外科杂志,2013,12(06):471-474.
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 RNA干扰对神经母细胞瘤细胞VEGFA的ｍRNA表达的影响

《临床小儿外科杂志》[ISSN:1671-6353/CN:43-1380/R] 卷: 第12卷 期数: 2013年06期 页码: 471-474 栏目: 论著 出版日期: 2013-12-28
作者:
 张雁冰  刘朝阳  卢其  周小渔
 湖南省儿童医院普外一科
关键词:
 ; 神经母细胞瘤;  血管内皮生长因子A
文献标志码:
A
摘要:
 目的构建表达VEGF—A的短发夹RNA真核表达载体，并通过其介导的RNA干扰作用，研究对人神经母细胞瘤细胞株IGR—N—91细胞中VEGF-A的mRNA表达的影响。方法根据VEGF—A的cDNA序列合成两对寡核苷酸片段，退火后分别插入真核表达载体组成重组质粒。对重组质粒进行PCR、测序鉴定验证后，经Western Blot筛选RNA干扰效果最佳的质粒，然后将该质粒转染人神经母细胞瘤细胞株IGR—N—91。转染48 h后提取总RNA，逆转录为CDNA，经RT—PCR半定量检测VEGF—A mRNA的表达水平。结果成功构建含有VEGF—A的RNA干扰片段真核表达载体，经Western Blot筛选后分别得到RNA干扰效果最佳的片段。RT—PCR结果表明质粒转染人神经母细胞瘤后VEGF—A的mRNA的表达升高。结论成功构建含有人VEGF—A的RNA干扰片段的真核表达载体，该重组质粒转染人神经母细胞瘤IGR—N—91细胞后VEGF—A的mRNA表达升高。

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