JNK2、TIMP-1及Collagen Ⅲ在胆道闭锁肝纤维化中的作用研究
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- 目的研究c—Jun氨基末端激酶2(c—Jun Nterminal kinase, JNK2)、金属蛋白酶组织抑制剂—1（tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP—1）及CollagenⅢ 在胆道闭锁（BA）肝组织中的表达情况及在肝纤维化进程中的作用。方法选取胆管扩张症肝活检病例10 例，为胆扩组；BA肝活检病例15 例，为BA组；BA晚期因肝功能衰竭而行肝移植患者自体肝活检10例，为肝移植组。采用HE染色观察并评价肝标本纤维化程度；免疫组化染色检测JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ在肝组织中的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT—PCR）检测肝组织中JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ基因表达情况。结果①HE染色： 胆扩组偶可见少许纤维细胞增生；BA组汇管区增宽，纤维组织增生、桥接纤维化现象普遍，可见假小叶形成；肝移植组汇管区明显增宽，纤维组织增生较重，广泛桥接纤维组织形成，假小叶显著。②免疫组化：胆扩组JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ表达为弱阳性，BA组及肝移植组JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ蛋白均在肝细胞、汇管区胆管上皮细胞及血管内皮细胞胞质中阳性表达。③半定量分析：三组JNK2（0122±0008、0182±0017 和0198±0033)，TIMP—1（0123±0009、0185±0012和0201±0017）和CollagenⅢ（0126±0012、0194±0008和0208±0033）表达比较，差异有显著统计学意义（P<0001）；三组中，BA组及肝移植组JNK2、TIMP-1及CollagenⅢ表达明显高于胆扩组（P＜005）；肝移植组JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ蛋白含量与BA组比较，差异无统计学意义(P值均＞005)。④qRT—PCR：三组JNK2、TIMP—1和CollagenⅢmRNA表达水平比较，差异有统计学意义（0221（017）vs 1395（122）vs 1095（121），H＝17686，P＝0003；0439（031）vs 1404（085）vs 1571（066），H＝20648，P＝0000；0917（009）vs 1802（135）vs 1957（130），H＝15555，P＝0007），BA组及肝移植组肝内JNK2、TIMP—1及CollagenⅢmRNA表达含量比胆扩组高（P值均小于0017)。结论JNK2、TIMP—1及CollagenⅢ在BA患儿随着肝纤维化加重而表达升高，表明其可能参与并促进BA肝纤维化进程。
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